Добрый день! Хотелось бы получить разъяснения по следующему вопросу: Хотим получить аккредитацию на помещение для работы с ПБА (патогенными биологическими агентами). Используя СанПиН 3.3686-21, а именно приложение 1 "ПБА ПО ГРУППАМ ПАТОГЕННОСТИ" мы смогли понять уровень биобезопасности и тип патогенности, который должны применить при оснащении помещений для работы с бактериями. Однако, в данном списке нет ничего касательно работы с лентивирусным вектором на основе дефектного вируса иммунодефицита человека HIV-1. Краткая выжимка из характеристики тех частиц, с которыми планируется работа: Лентивирусные частицы – высокоэффективное удобное в применении современное средство доставки генетического материала в различные типы клеток. Готовые к работе лентивирусные частицы получены в культуре клеток 293Т с помощью временной ко-трансфекции самоинактивирующийся лентивирусного вектора третьего поколения, несущего ген флуоресцентного белка, и хелперных плазмид, кодирующих структурные белки и оболочку вируса везикулярного стоматита. Лентивирусный вектор разработан на основе дефектного вируса иммунодефицита человека HIV-1. Упаковка частиц в оболочку вируса везикулярного стоматита обеспечивает лентивирусам широкий тропизм к клеткам различного видового и тканевого происхождения. Лентивирусы высокоэффективны в любых клетках человеческого происхождения (в том числе первичных культурах) и способны трансдуцировать делящиеся, неделящихся, а также труднотрансфецируемых клетки. Лентивирусные векторы эффективно встраиваются в геном клеток-мишеней, вызывая стабильную экспрессию флуоресцентного белка через 48-72 часа после добавления к клеточной культуре. Обработка клеток препаратом вирусных частиц приводит к проникновению в цитоплазму клетки-мишени вирусной РНК и белков. Вирусная обратная транскриптаза синтезирует с РНК-генома вируса ДНК-копию, которая интегрируется в геном клетки-хозяина. Интегрированный вирусный геном не способен к полной транскрипции из-за наличия в структуре «самоинактивирующегося» LTR, что приводит к абортивной инфекции (трансдукции) клеток. В трансдуцированных клетках происходит экспрессия флуоресцентного белка под контролем внутреннего универсального промотора фактора элонгации трансляции EF1α. Хотелось бы понять, к какому уровню безопасности относятся работы такого плана. Какой тип патогенности для таких псевдовирусов. Спасибо

Опубликовано: 19.10.2023 в 10:19

Ответы